Hoefer SE615 - Manuel (Page 12)

Verser standards gels
homogènes
Tableau 3. Gel roulettes et le volume
nécessaire
poudre de gel volume requis fabricant gradient
(ml) taille*
SE615 190–500 SG500
SE675 60 –150 SG100 ou
SG500
*Taille réelle dépend du volume calculé.
1
Préparer une solution et dégazer monomère quantité
suffisante pour remplir tous les sandwichs au niveau
de la plaque à encoches.
La formule suivante permet à la solution supplémen-
taire pour combler l’espace entre le sandwich et la
chambre:
N gel d’empilement. Remplir solution à juste en
dessous du haut de la plaque à encoches. Si des
poches d’air se former, retirer avec une pipette ou une
seringue. Mettre en place un peigne, avec un léger
angle, dans chaque sandwich, en prenant soin de ne
pas emprisonner de l’air sous les dents.
Gel d’empilement. Remplir solution à 4 cm en
dessous du haut de la plaque de verre rectangulaire.
Cette hauteur permet 1 cm de gel d’empilement
ci-dessous les puits. Verser le gel et appliquer une
superposition. Après le gel est fixé, de préparer le gel
d’empilement comme décrit à la page 15.
Électrophorèse 2-D. Remplir la solution à environ
1,0 cm en dessous du haut de la plaque de verre
rectangulaire. Cette hauteur permet 4 à 5 mm d’es-
pace pour la bande IPG et un joint d’agarose. Super-
posez le gel de séparation telle que décrite à l’étape 3.
Attention! L’acrylamide est
une neurotoxine. Porter des
gants lors de la manipulation
d’acrylamide ou de
polyacrylamide. Portez un
masque anti-poussière lors de
la pesée d’acrylamide ou de
la préparation de stocks de
l’acrylamide.
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p9
Remarque: Le multiplicateur
de 1,1 en cette formule assure
suffisamment de solution pour
combler le volume mort. Monomer vol. = hauteur × largeur × entretoise × nombre total × 1,1
(ml)
(cm) (cm) épaisseur (cm) sandwichs gel