Eppendorf AF2200 Plate Reader - Manuel (Page 39)

Commande
Eppendorf ® PlateReader AF2200
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6.2.4 Mesures Multimode
le logiciel permet des mesures Multimode. Cela signifie que 10 mesures par plaque / zone de plaque
(pattern) sont possibles dans les modes absorbance, Fluorescence Intensity ou dans une combinaison des
deux.
6.2.5 Mesures en mode radio (= mesures par puits)
Le traitement par puits d'une ou plusieurs mesure(s) est limité à 4 bandes de mesure du même mode à la
suite.
6.3 Optimiser les mesures de fluorescence
Les résultats de la mesure de fluorescence peuvent être améliorés d'une part en adaptant les paramètres
d'appareil suivants et d'autre part en sélectionnant des matériaux appropriés.
6.3.1 Amplification de signal
Le système de détection de fluorescence utilise une conversion ADC du signal PMT (ADC: Analog Digital
Converter). L'amplification de signal (=Gain) commande l'amplification du signal PMT lors de la conversion
de la lumière fluorescente en courant électrique. L'ADC nécessite d'une part une intensité PMT suffisante
pour générer un rapport signal bruit (S/N) adéquat et d'autre part de la linéarité. Pour cette raison,
l'amplification du signal doit être réglée de telle sorte que les puits dans les microplaques donnent des
résultats de mesure les plus élevés possibles avec la concentration la plus élevée. Les intensités de signal
des puits dans les microplaques à faible concentration se distinguent alors de l'arrière-plan, si le bruit
d'arrière-plan le permet.
6.3.2 Propriétés PMT
L'amplification de signal pour l'intensité de fluorescence peut être sélectionnée dans une plage de 1 – 255.
La puissance PMT dépend de la tension d'alimentation. Les PMT sont conçus pour une plage de 300 à 1250
V. Le rapport entre l'amplification du signal réglée et la tension d'alimentation est décrit dans l'équation
ci-dessous. La plage de tension d'alimentation du PMT correspond aux réglages de l'amplification du
signal entre 60 et 255. Les réglages de l'amplification inférieurs à 60 sont possibles et peuvent être utiles
pour des applications spéciales, mais le PMT n'est pas conçu pour une tension d'alimentation < 300 V.
C'est pourquoi Eppendorf décline toute responsabilté pour les résultats de mesure avec un réglage de
l'amplification de signal inférieur à 60.
Si un puits a le statut "OVER" (Overflow), vous pouvez réduire l'amplification du signal ou
sélectionner une amplification automatique (voir le mode d'emploi du logiciel).
V 1250 *
255
Gain
U =